Q：本人現(xiàn)在用三重四級(jí)桿LCMSMS定量分析目標(biāo)物，但是沒有標(biāo)準(zhǔn)品。內(nèi)標(biāo)法該具體怎么操作呢？資料說先配制一定重量比的待測組分和內(nèi)標(biāo)樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關(guān)系曲線，此曲線即為標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果這樣的話，沒有標(biāo)準(zhǔn)品怎么辦？

方法一：

1、內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析，同樣需要待測物標(biāo)準(zhǔn)品。如果沒有待測物標(biāo)準(zhǔn)品就不能準(zhǔn)確測量其含量，因?yàn)闊o法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2、沒有待測物標(biāo)準(zhǔn)品不能準(zhǔn)確測量其含量，但可以通過加入內(nèi)標(biāo)的方法測量待測物的相對含量，可以比較待測物在各樣品中的多少及相差倍數(shù)。

3、用LCMSMS做定量一般都采用MRM的掃描方式，你沒有待測物標(biāo)準(zhǔn)品，就無法建立和優(yōu)化MRM掃描的質(zhì)譜參數(shù)，這樣你只能使用FULL SCAN或SIM的掃描方法。沒有待測物標(biāo)準(zhǔn)品，你也無法準(zhǔn)確得到待測物在LC上的保留時(shí)間，如果你的樣品中有與待測物相似質(zhì)量數(shù)的化合物，你得到的色譜峰就不會(huì)很純凈，會(huì)對你判定那個(gè)是你的待測化合物產(chǎn)生干擾。

方法二：沒有標(biāo)準(zhǔn)品，就只用面積相對定量。然后選用LCMSMS的SIM模式（樣品雜質(zhì)比較少，選擇同位素豐度為100%的分子量，上下增減0.2）?？疾煲蛩貙?dǎo)致的量的改變比較微量，選擇一種物質(zhì)為回收率指示物（反應(yīng)液前處理前加入），一種物質(zhì)為內(nèi)標(biāo)物（前處理后、液相小瓶中進(jìn)樣測試前，在待測樣品中加入定量的內(nèi)標(biāo)物，然后進(jìn)行測試）。

Q：請問液質(zhì)聯(lián)用中質(zhì)譜跑出來用于定性的圖譜是什么樣的，既然是用質(zhì)譜來進(jìn)行定量的話，那色譜本身配置的紫外檢測器跑出來的圖譜用于何用？液質(zhì)聯(lián)用有SIM和全掃描的，那么一般在藥物代謝動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)中一般用哪一種呢？尤其是在對體內(nèi)藥物分析時(shí)，內(nèi)標(biāo)法用于定量的質(zhì)譜圖是什么樣的？

質(zhì)譜定量分析，使用的一般是LCMS/MS,不使用LCMS, 看一下質(zhì)荷比，推測下分子量。UV可以用來定量，但是在有紫外吸收的干擾峰的時(shí)候，定量是不準(zhǔn)的。LCMS/MS使用母離子/子離子來進(jìn)行定量，相對來說，干擾要少的多，也比較準(zhǔn)確，在PK/TK的應(yīng)用很廣泛。這里只有LCMS/MS定量的譜圖，僅供參考！