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ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)：揭開脂質(zhì)結(jié)構(gòu)神秘面紗，提供組學(xué)研究精確視角
2022年02月24日 11:48
來源：SCIEX
代謝組學(xué)和脂質(zhì)組學(xué)已越來越成為生命科學(xué)研究的關(guān)鍵手段，然而脂質(zhì)分子的精準(zhǔn)結(jié)構(gòu)闡釋、低豐度代謝物的準(zhǔn)確定性和定量，依然存在挑戰(zhàn)。
以花生四烯酸為例，其學(xué)名為二十碳四烯酸，屬Omega6族長鏈多元不飽和脂肪酸，這種具有四個雙鍵的20碳脂肪酸于1909年由 Percival Hartley 從哺乳動物組織中被分離并鑒定出來。這是在色譜法或任何光譜方法（MS、紅外、UV 或 NMR）出現(xiàn)之前完成的。1913年，根據(jù)其與的花生酸 (C20:0) 的關(guān)系，提出了花生四烯酸這一名稱。直到 1940 年，四個雙鍵的位置才被定義為 20 個碳鏈的 5,8,11,14。1961 年報道了全合成，最后，雙鍵的構(gòu)型被確認(rèn)為all cis-5,8,11,14?；ㄉ南┧岬慕Y(jié)構(gòu)確證歷經(jīng)約50年，幾代研究者從碳鏈的長度，雙鍵的位置，化學(xué)合成等方面對花生四烯酸進行了完整的研究。其中四個雙鍵的位置經(jīng)歷了幾位科學(xué)家共同努力才得以確證，其艱難曲折的過程證明了確定雙鍵位置是一個重大的難題和挑戰(zhàn)。假如當(dāng)時有質(zhì)譜技術(shù)這些研究將變得簡單，SCIEX ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)電子活化解離（EAD）技術(shù)可以在一次實驗中完成脂質(zhì)的完整表征，包括鑒定脂質(zhì)的端基、區(qū)域異構(gòu)、順/反異構(gòu)、骨架、雙鍵等，提供脂質(zhì)組學(xué)深度研究的精確視角，同時Zeno™ Trap（Zeno 阱）功能使發(fā)現(xiàn)更低含量的代謝物成為可能。
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質(zhì)譜作為脂質(zhì)組學(xué)最重要的研究手段之一，在脂質(zhì)雙鍵異構(gòu)體的鑒定方面卻面臨著極大的挑戰(zhàn)。這主要是因為在傳統(tǒng)的脂質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜分析中，所采用的碰撞誘導(dǎo)解離技術(shù) (CID)，無法使目標(biāo)物在C=C鍵處斷裂產(chǎn)生與其位置相關(guān)的特征離子。ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)的電子活化解離技術(shù) (EAD) 可以在單鍵處斷裂，雙鍵處不斷裂，直觀的幫助我們判斷出雙鍵位置，同時這種碎裂模式得到豐度的碎片信息，獲得更多脂質(zhì)結(jié)構(gòu)診斷信息，可以判斷脂質(zhì)類別，每條脂肪酸鏈信息和雙鍵位置，很適用于脂質(zhì)化合物和脂質(zhì)組學(xué)的深度研究。本文使用ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)對甘油三酯類化合物進行深度結(jié)構(gòu)解析，一針進樣即可快速得到頭基、特征診斷離子、脂肪酸鏈和雙鍵位置信息，鑒定甘油三酯化合物。
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本文使用ZenoTOF™ 7600系統(tǒng)的電子活化解離技術(shù)對脂質(zhì)結(jié)構(gòu)進行解析，方法具有以下特點：
1.可以一針進樣得到脂質(zhì)豐富的碎片信息，可以得到頭部基團、脂質(zhì)骨架、特征診斷離子、脂肪酸鏈和雙鍵位置信息，準(zhǔn)確的鑒定出脂質(zhì)化合物。
2.對于CID技術(shù)得到的頭部基團信息一致，需要耗時去區(qū)分的兩大類脂質(zhì)磷脂酰膽堿(PC)和鞘磷脂(SM)，可以直接通過EAD技術(shù)得到的二級質(zhì)譜圖判斷。
3.可優(yōu)化的電子動能(Electron KE)和電子流(Electron beam current)可以得到更豐富和質(zhì)量好的二級碎片，Zeno™ trap的阱集功能可以使得即使很低的碎片依舊可以得到，更準(zhǔn)確的判斷化合物結(jié)構(gòu)。
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Zeno Trap在代謝組學(xué)中的應(yīng)用特點：
1.定量實驗，提高MRMHR(高分辨多重反應(yīng)監(jiān)測)定量靈敏度；
2.定性實驗，提高數(shù)據(jù)庫匹配的置信度；特別是對低含量化合物，也能獲得優(yōu)異的數(shù)據(jù)庫匹配；
3.大隊列實驗中，配合130 Hz (5 ms/ scan)快速掃描速度，保證化合物的覆蓋率和MS/MS譜圖質(zhì)量的前提下，至少可以縮減一半的樣品運行時間。
參考文獻：
Martin, Sarah A., Alan R. Brash, and Robert C. Murphy. "The discovery and early structural studies of arachidonic acid." Journal of lipid research 57.7 (2016): 1126-1132.
關(guān)鍵詞：
質(zhì)譜儀
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