本文由中國藥科大學(xué)藥物代謝與藥代動(dòng)力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室天然藥物國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室所作，發(fā)表于DRUG METABOLISM AND DISPOSITION  （2018）46:53–65。

胃腸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)之間的雙向溝通途徑，稱為“腸-腦軸”，其與腦損傷的治療越來越相關(guān)。盡管血漿和大腦暴露濃度水平極低，三七總皂苷提取物(PNE)仍是預(yù)防和治療心腦血管缺血性疾病的常用藥物。迄今為止，PNE神經(jīng)保護(hù)作用的潛在機(jī)制在很大程度上仍然未知。本文通過研究PNE對(duì)胃腸微生物群落和γ-氨基丁酸(GABA)受體的調(diào)節(jié)，系統(tǒng)地探明了PNE的神經(jīng)保護(hù)作用。

結(jié)果表明，PNE預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血/再灌注(I/R)損傷有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用，但對(duì)無菌大鼠的保護(hù)作用減弱。PNE預(yù)處理可顯著防止I/R手術(shù)引起的長雙歧桿菌(Bifidobacterium longum, B.L.)下調(diào)，B.L.定植也可發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。更重要的是，PNE和B.L.均可上調(diào)I/R大鼠海馬GABA受體的表達(dá)，同時(shí)給予GABA-B受體拮抗劑可顯著減弱PNE和B.L.的神經(jīng)保護(hù)作用。上述研究表明，PNE的神經(jīng)保護(hù)作用可能主要?dú)w因于其對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)，口服PNE也可通過上調(diào)GABA-B受體用于I/R損傷的治療。

使用儀器：島津LCMS-8050

圖1 正常、I/R模型和I/R + PNE大鼠(n = 6/組)的TTC染色腦冠狀切片(A)、梗死體積(B)和神經(jīng)功能缺損評(píng)分(C)。PGF、PGF + I/R模型和PGF + I/R + PNE大鼠(n = 6/組)的TTC染色腦冠狀切片(D)、梗死體積(E)和神經(jīng)功能缺損評(píng)分(F)。大鼠海馬中IL-1b水平(*P，0.05，**P，0.01 vs對(duì)照組，#P，0.05 vs I/R組，# P，0.01 vs I/R組) (G)，大鼠海馬中IL-6水平(**P，0.01 vs對(duì)照組，#P，0.05 vs PGF+I/R組，# P，0.01 vs I/R組) (H)和大鼠海馬中BDNF水平(*P，0.05 vs對(duì)照組，# P，0.05 vs I/R組) (I) (n = 6/組)

圖2 B.L.的神經(jīng)保護(hù)作用(n = 6/組)。(A) TTC染色的腦冠狀切片、(B)梗死體積、(C) 神經(jīng)功能缺損評(píng)分、(D) IL-1b、(E) IL-6、 (F) TNF-a、 (G) BDNF (*P，與對(duì)照組比較0.05，# P，與I/R組比較0.05)

圖3 Western blotting檢測PNE和B.L對(duì)GABA-B受體(R1、R2)表達(dá)的影響(n = 6/組)。(A) GABA-B R1、GABA-B R2、GAPDH對(duì)應(yīng)的蛋白帶;(B) GABA-B R1蛋白表達(dá)的灰度分析;(C) GABA-B R2蛋白表達(dá)的灰度分析。(*P, 0.05 vs對(duì)照組，#P, 0.05 vs I/R組，##P, 0.01 vs I/R組)

圖4 GABA-B受體拮抗劑對(duì)PNE療效的影響(n = 6/組)。(A) TTC染色的大腦冠狀面、(B)大鼠大腦梗死體積、(C)大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、(D) IL-1b水平、(E) IL-6水平、(F) TNF-α水平(* P, 0.05)

因此，本研究結(jié)果表明，I/R手術(shù)改變了腸道菌群，下調(diào)了B.L的數(shù)量，B.L水平的下降導(dǎo)致GABA受體表達(dá)的下調(diào)。PNE預(yù)處理后可在一定程度上預(yù)防腸道菌群I/R相關(guān)的變化，顯著提高B.L的相對(duì)豐度。B.L水平的升高可上調(diào)大鼠海馬GABA-A和GABA-B受體的表達(dá)，而GABA-B受體的上調(diào)在缺血性腦損傷中起保護(hù)作用。據(jù)我們所知，這是首篇闡明PNE涉及腸道微生物群的大腦保護(hù)作用的報(bào)告。值得注意的是，B.L在PNE通過上調(diào)GABA-B受體治療腦I/R中起著關(guān)鍵作用。

文獻(xiàn)題目

《Low Cerebral Exposure Cannot Hinder the Neuroprotective Effects of Panax Notoginsenosides》

使用儀器

島津LCMS-8050

作者

Haofeng Li, Jingcheng Xiao, Xinuo Li, Huimin Chen, Dian Kang, Yuhao Shao, Boyu Shen,Zhangpei Zhu, Xiaoxi Yin, Lin Xie, Guangji Wang, and Yan Liang

Key Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, tate Key Laboratory of Natural Medicines, China Pharmaceutical University, Nanjing, China