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全譜二維LC系統(tǒng),開啟質(zhì)譜分析新篇章

2024年03月08日 10:02 來源:島津企業(yè)管理(中國)有限公司

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導(dǎo)讀

為了提高客戶體驗(yàn)、改善后續(xù)產(chǎn)品和方案,島津通過問卷方式咨詢了用戶多個儀器相關(guān)問題,其中一個問題是,大家最關(guān)注質(zhì)譜前端液相分離系統(tǒng)的哪些性能和特點(diǎn)?我們的最終統(tǒng)計結(jié)果是:

 

1)化合物極性覆蓋范圍廣,峰容量大=50%;

2)功能多樣化,機(jī)多用=25%;

3)性價比/價格=12%;

4)耐壓能力=8%;

5)其他=5%。

 

img1 

 

這樣的結(jié)果可能跟很多剛接觸LC-MS的技術(shù)人員的認(rèn)知有差異。讓我們對這幾個選項(xiàng)做一一分析。

 

01性價比

1984年John Bennett Fenn發(fā)明電噴霧(ESI)技術(shù)以來,LC-MS的發(fā)展日新月異,并廣泛的應(yīng)用于各領(lǐng)域。目前液相色譜的細(xì)分類型、品牌、型號選擇很多,加上政府對分析測試領(lǐng)域的官需引導(dǎo)民需需求持續(xù)加大,推廣使用LC-MS標(biāo)準(zhǔn)/分析項(xiàng)目日益增多,產(chǎn)品的性價比/價格已經(jīng)不是第一考慮因素,重要的是該產(chǎn)品能否完成客戶計劃、預(yù)期的分析課題。

 

02耐壓能力

ESI的發(fā)明,對液相色譜提出了更快速度、更高靈敏度的要求,超高壓液相色譜(UHPLC)順勢而生:它具有更大的系統(tǒng)壓力/推力,可匹配更細(xì)的色譜柱填料顆粒,可在更短的時間內(nèi)分離更多的目標(biāo)物(色譜峰),并因更小的流速提高霧化效果最終提高離子化效率和質(zhì)譜靈敏度。然而耐壓能力越大,儀器成本越高,應(yīng)該根據(jù)實(shí)際項(xiàng)目選擇合適的壓力。

 

03化合物極性覆蓋范圍寬,峰容量大

LC-MS所廣泛應(yīng)用的生命科學(xué)、醫(yī)藥臨床、食品安全等領(lǐng)域,通常需要在復(fù)雜基質(zhì)中分離、分析多種目標(biāo)物質(zhì)。當(dāng)目標(biāo)物數(shù)量多且極性差異大時,就難以用一個色譜柱完成對所有物質(zhì)的分析。目前常規(guī)方案是采用兩種色譜分離方法,如親水作用色譜柱和反相色譜柱,分別對應(yīng)進(jìn)行高極性物質(zhì)和中低極性物質(zhì)的分析。這樣的處理方式,往往需要耗費(fèi)雙倍的前處理時間、分離分析時間,不利于提高分析效率;且會產(chǎn)生雙份數(shù)據(jù)、交叉冗余數(shù)據(jù),定性分析難度高。因此,如果前端液相系統(tǒng)能覆蓋更寬極性、更多的目標(biāo)物,將會非常有利于科學(xué)研究的開展。該選項(xiàng)獲得最多用戶的選擇。

 

04功能多樣化,機(jī)多用

正是因?yàn)?/span>LC-MS技術(shù)廣泛應(yīng)用于許多領(lǐng)域,每個領(lǐng)域有多種課題,不但需要不同的分析方法,很可能對前端分離液相也提出了不同的需求。因此,前端分離系統(tǒng),如果既有特殊的差異化的硬件功能,還能在盡可能少改動或無改動的情況下就能滿足常規(guī)分析項(xiàng)目,無疑將錦上添花。有1/4的客戶選擇了這個選項(xiàng)。

 

 

島津全譜二維液相系統(tǒng)的四大優(yōu)勢

 

完美主義的客戶可能會問

 

有沒有哪種前端液相,同時滿足以上四個性能需求的?

有!島津全譜二維液相系統(tǒng)滿足您所有的期待。

 

img2 

 

全譜二維液相系統(tǒng)是島津獨(dú)家產(chǎn)品,擁有極性分流(發(fā)明專利號ZL202010477040.0)、在線稀釋(發(fā)明專利號ZL201410187543.9),和雙重梯度(發(fā)明專利號ZL202110407632.X)三大專利技術(shù)。具有以下幾個優(yōu)勢:

 

01極性覆蓋范圍寬

可一針實(shí)現(xiàn)寬極性多目標(biāo)物的同時分析,其極性覆蓋LogP值可達(dá)-8.79~26.86,遠(yuǎn)大于常規(guī)親水作用色譜柱(LogP范圍約-8~1)和反相色譜柱(LogP范圍約1~20)的總和范圍;因此可以勝任絕大多數(shù)分析項(xiàng)目中寬極性、多組分分析的要求。

 

img3 

 

02機(jī)多用

該系統(tǒng)內(nèi)置一個UHPLC子系統(tǒng),無需任何手動管路連接、硬件切換,即可直接用于常規(guī)項(xiàng)目的分析。另外,該系統(tǒng)可匹配島津所有種類、型號質(zhì)譜,包括單四級桿質(zhì)譜、三重四級桿和高分辨質(zhì)譜。

 

03耐壓高

得益于島津積木式設(shè)計的液相系統(tǒng),全譜二維可以根據(jù)客戶需求,選擇島津最新LC-40液相的不同型號,組成滿足不同壓力需求的配置,最高可達(dá)130Mpa耐壓需求。

 

04性價比高

綜上所述,全譜二維能用于寬極性多組分的一針分析,能滿足常規(guī)項(xiàng)目分析,耐壓高、配置靈活多樣,而且因?yàn)樵撓到y(tǒng)是島津中國分析中心自主研發(fā),無增收額外的研發(fā)附加費(fèi),無溢價,性價比超高。

 

全譜二維液質(zhì)系統(tǒng)的四大應(yīng)用方向

 

基于全譜二維液質(zhì)系統(tǒng)的特點(diǎn)和優(yōu)勢,目前島津與國內(nèi)多個課題組合作,開發(fā)了四大應(yīng)用方向。

 

img4 

全譜二維液質(zhì)系統(tǒng)的應(yīng)用方向

 

全組分分析以及非靶向代謝組學(xué)

全組分分析以及非靶向代謝組學(xué),都是不對樣品/基質(zhì)中的未知目標(biāo)物做任何預(yù)設(shè)的分析方法,包括對目標(biāo)物的數(shù)量、種類、極性范圍。因此用一般的反相色譜或親水相色譜,因其對化合物極性范圍的分離局限性,無法涵蓋大部分未知物。而使用全譜二維液質(zhì)系統(tǒng),可以將反相色譜和親水相色譜結(jié)合起來,再加上雙重梯度技術(shù),可以極大的將分離的極性范圍擴(kuò)大到LogP值-8~26之間,非常適合于復(fù)雜基質(zhì)中多未知物的一針分析。

 

典型案例分享

《全譜二維液相-四極桿-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)用于非靶向代謝組學(xué)和脂質(zhì)組學(xué)的共同研究》,由華南理工大學(xué)和島津聯(lián)名發(fā)表在分析化學(xué)領(lǐng)域TOP期刊Analytical Chemistry。:本研究詳細(xì)介紹了全譜二維液質(zhì)系統(tǒng)的原理和優(yōu)勢,并利用全譜二維液相系統(tǒng)結(jié)合四桿-飛行時間質(zhì)譜對抑郁癥大鼠血漿進(jìn)行了非靶向代謝組學(xué)分析?;谌V二維液相系統(tǒng),共找到8083個特征峰,其中第一維2713個,第二維5370個。

 

圖表, 直方圖

描述已自動生成 

親水柱、反相色譜柱和全譜二維分離LogP值介于-8.79~26.86目標(biāo)物的色譜圖比較

 

數(shù)據(jù)庫及靶向代謝組學(xué)

數(shù)據(jù)庫的建立和靶向代謝組學(xué)的思路一致,即對較多數(shù)量的已知目標(biāo)物進(jìn)行定量或半定量分析。然而,常規(guī)的數(shù)據(jù)庫或靶向代謝組學(xué),受限于分離系統(tǒng)的極性范圍而不得已只能選擇反相色譜或親水相色譜作為分離手段,或者分別用反相色譜和親水相色譜多次進(jìn)樣分析,極大的限制了方法所涵蓋目標(biāo)物的數(shù)量和極性范圍。全譜二維技術(shù)讓數(shù)據(jù)庫和靶向代謝組學(xué)的目標(biāo)物群體可以盡可能的加大數(shù)量,從而形成一個涵蓋目標(biāo)物多且極性范圍極大的大型數(shù)據(jù)庫或靶向代謝組學(xué)方法。

 

典型案例分享

《全譜二維液相-液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)用于前列腺癌生物標(biāo)志物篩選》,由廈門大學(xué)化學(xué)院、公衛(wèi)學(xué)院和島津聯(lián)名發(fā)表在Analytical Chimica Acta:基于全譜二維液相系統(tǒng)結(jié)合四桿-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng),建立了420個常見代謝物數(shù)據(jù)庫,并對前列腺癌患者和正常人的尿液外體樣本進(jìn)行了代謝組學(xué)分析。

 

圖片包含 游戲機(jī)

描述已自動生成 

全譜二維數(shù)據(jù)庫:包含420常見代謝物

 

相關(guān)物質(zhì)的共同分析

這里所指相關(guān)物質(zhì),是極性差異較大、但化合物之間有較強(qiáng)相關(guān)性的物質(zhì)。比如中藥、天然產(chǎn)物里數(shù)量眾多的活性物質(zhì),彼此之間可能存在相似的結(jié)構(gòu),極性、活性、藥效可能差異較大,但其整體分析對于天然產(chǎn)物的藥效藥理分析卻十分重要。再比如,小分子藥物或天然產(chǎn)物的某活性成分,進(jìn)入體內(nèi)之后會進(jìn)行一系列的代謝途徑,從而產(chǎn)生眾多結(jié)構(gòu)相關(guān)但極性差異較大的代謝物,然后進(jìn)入器官靶點(diǎn)產(chǎn)生藥效,最后排出體外。這些過程都將產(chǎn)生極性差異較大的相關(guān)物質(zhì),有必要在一次分析中進(jìn)行共同分析。使用全譜二維就可以達(dá)到一針分析極性差異很大、數(shù)量眾多的相關(guān)物質(zhì)。

 

典型案例分享

《全譜二維液相-四極桿-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)分析丹參活性成分》:本研究利用全譜二維液相色譜和四桿飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用分析發(fā)現(xiàn)了丹參中的150個活性成分,包括酸類、二萜類、糖類、氨基酸類及其它類別成分,其中未在丹參中報道過的活性化合物有33個。

 

圖表, 圖示, 直方圖

描述已自動生成 

親水柱、C18柱和全譜二維分離丹參有效成分的色譜圖比較

 

提高峰容量和分離度

因?yàn)槿V二維理論上是將反相色譜、親水相色譜和雙重梯度加以結(jié)合,拓寬了分離極性范圍,也同時也極大的提高了分離的峰容量,也能一定程度優(yōu)化、改善分離度。比如對于一些具有兩性基團(tuán)的物質(zhì),如果只用反相或親水相色譜,雖然能完成分離,但目標(biāo)物數(shù)量一多,就很難得到完美的分離,峰容量可能也會不夠。而使用全譜二維,則可以利用反相和親水相的分離能力,將兩性基團(tuán)物質(zhì)分流進(jìn)入不同的色譜體系中,有效提高峰容量,并更容易進(jìn)行分離度的改善。目前和中國疾控營養(yǎng)所進(jìn)行項(xiàng)目合作中,暫不便公開數(shù)據(jù)。

 

結(jié)語

綜上所述,在LC-MS如日中天的新時代,我們極力推薦全譜二維液相色譜作為質(zhì)譜前端系統(tǒng)。全譜二維可與桿質(zhì)譜和飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用,助力復(fù)雜基質(zhì)中寬極性痕量物質(zhì)的定性、定量、篩查和分析,并具備機(jī)多用、配置靈活多樣等優(yōu)勢,并可應(yīng)用于全組分分析/非靶向代謝組學(xué),數(shù)據(jù)庫篩查/靶向代謝組學(xué),相關(guān)物質(zhì)的共同分析,提高峰容量和分離度等多個方向。相信這個理想四邊形戰(zhàn)士可以用更少的時間、經(jīng)濟(jì)成本,幫助科研分析人員完成更多、更好的數(shù)據(jù)成果。

 

撰稿人:鐘啟升

 

參考文獻(xiàn)

1. Jieqing Feng, Qisheng Zhong, Jiangmeng Kuang, Jiaqi Liu, Taohong Huang, and Ting Zhou. Simultaneous Analysis of the Metabolome and Lipidome Using Polarity Partition Two-Dimensional Liquid ChromatographyMass Spectrometry. Anal. Chem. 2021, 93, 15192-15199

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3. Liping Zhang, Lingling Shen, Qisheng Zhong, Ting Zhou. Diluting modulation-based two dimensional-liquid chromatography coupled with mass spectrometry for simultaneously determining multiclass prohibited substances in cosmetics. Journal of Chromatography A 1695 (2023) 463954

 

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